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        • IPTG | 367-93-1
        IPTG | 367-93-1
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        中文名稱:異丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)
        參數品牌:AVT
        產品參數
        品牌:AVT
        CAS號:367-93-1
        儲存方式:推薦2-8℃存儲。
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        產品詳情
        宣傳冊下載
        技術支持及常見問題解答

        1、中文名稱:異丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)

        2、英文名稱:Isopropyl β-D-Thiogalactopyranoside

        3、化學名稱:異丙基β-D-硫代半乳糖苷

        4、分子式:C9H18O5S

        5、CAS:367-93-1

        6、級別:化學試劑級

        7、貨號:    


        一、 理化性質

        1、 結構:

        2、性狀:白色晶體粉末

        3、純度:≥99%

        4、分子量:238.3

        5、熔點:110℃-114℃

        6、比旋光度:-32°

         

        二、 運輸與保存

        推薦2-8℃存儲。

        三、 使用注意事項

        1、含有 IPTG 的培養基 4℃避光保存,須在 1 周內使用。

        2、為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

        3、本產品僅作科研用途。

         

        四、 應用

        1、儲存液配制

        ①稱取 0.238 g IPTG;加入10 mL去離子水充分溶解,配制 0.1 M 的儲存液;

        ②用5-10 mL去離子水潤濕0.22μm濾膜;

        ③上述 IPTG 溶液用0.22μm濾膜除菌,分裝成 1 mL,-20℃冷凍保存。

         

        2、 藍白斑篩選

        IPTG是β-半乳糖苷酶的活性誘導物質。基于這個特性,當pUC系列的載體DNA(或其他帶有lacZ 基因載體DNA)以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時,如果在平板培養基中加入X-gal和IPTG,由于β-半乳糖苷酶的α-互補性,可以根據是否呈現白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體。此外,它還可以作為具有lac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導物使用。

        (1) X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養基溶液

        ①高壓滅菌已加瓊脂的培養基,并冷卻到 50℃左右。

        ②每毫升培養基內加入 10μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10μL 0.1 M 的 IPTG(使其終濃度達到 1 mM);

        ③加入適量抗生素;

        ④混勻后按照平板大小倒入適量培養基,待培養基冷卻至室溫后,接種細菌于 37℃過夜培養。

        (2)X-Gal、IPTG 加到瓊脂平板表面

        ①于無菌超凈工作臺制備平板(如LB瓊脂板);

        ②取40μL 0.1 M IPTG和120μL 20 mg/mL X-gal 混合,均勻地涂布于準備好的平板上;

        備注:平板邊緣較難充分涂布均勻,容易產生假陽性,因此,為了得到更好結果,建議后續操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。

        ③37℃孵育直至所有液體被吸收(30 min 或更長)。接種細菌于 37℃過夜培養直到菌落形成。

        ④根據長出菌體的藍白色,方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。


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        品牌:AVT
        CAS號:367-93-1
        儲存方式:推薦2-8℃存儲。
        400-6262-623
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        1、中文名稱:異丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)

        2、英文名稱:Isopropyl β-D-Thiogalactopyranoside

        3、化學名稱:異丙基β-D-硫代半乳糖苷

        4、分子式:C9H18O5S

        5、CAS:367-93-1

        6、級別:化學試劑級

        7、貨號:    


        一、 理化性質

        1、 結構:

        2、性狀:白色晶體粉末

        3、純度:≥99%

        4、分子量:238.3

        5、熔點:110℃-114℃

        6、比旋光度:-32°

         

        二、 運輸與保存

        推薦2-8℃存儲。

        三、 使用注意事項

        1、含有 IPTG 的培養基 4℃避光保存,須在 1 周內使用。

        2、為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

        3、本產品僅作科研用途。

         

        四、 應用

        1、儲存液配制

        ①稱取 0.238 g IPTG;加入10 mL去離子水充分溶解,配制 0.1 M 的儲存液;

        ②用5-10 mL去離子水潤濕0.22μm濾膜;

        ③上述 IPTG 溶液用0.22μm濾膜除菌,分裝成 1 mL,-20℃冷凍保存。

         

        2、 藍白斑篩選

        IPTG是β-半乳糖苷酶的活性誘導物質。基于這個特性,當pUC系列的載體DNA(或其他帶有lacZ 基因載體DNA)以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時,如果在平板培養基中加入X-gal和IPTG,由于β-半乳糖苷酶的α-互補性,可以根據是否呈現白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體。此外,它還可以作為具有lac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導物使用。

        (1) X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養基溶液

        ①高壓滅菌已加瓊脂的培養基,并冷卻到 50℃左右。

        ②每毫升培養基內加入 10μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10μL 0.1 M 的 IPTG(使其終濃度達到 1 mM);

        ③加入適量抗生素;

        ④混勻后按照平板大小倒入適量培養基,待培養基冷卻至室溫后,接種細菌于 37℃過夜培養。

        (2)X-Gal、IPTG 加到瓊脂平板表面

        ①于無菌超凈工作臺制備平板(如LB瓊脂板);

        ②取40μL 0.1 M IPTG和120μL 20 mg/mL X-gal 混合,均勻地涂布于準備好的平板上;

        備注:平板邊緣較難充分涂布均勻,容易產生假陽性,因此,為了得到更好結果,建議后續操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。

        ③37℃孵育直至所有液體被吸收(30 min 或更長)。接種細菌于 37℃過夜培養直到菌落形成。

        ④根據長出菌體的藍白色,方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。


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